冷凍卵子的技術目前已經普遍應用在各種療程，例如：卵巢功能較差，須多次取卵才有足夠可用卵子之試管嬰兒療程 (合卵)、使用卵子庫之受贈者及冷凍卵子預存生育力者。然而這些經冷凍保存的卵子在解凍後的存活率是否能夠符合我們的期待？是否有方法可以提高解凍存活率？這些都是我們關心的問題。
此研究的目的為探討注射破卵針 (hCG) 至取卵之時間間隔是否影響冷凍卵子之解凍存活率，為回溯性之研究，收集從 2011 年 1 月至 2016 年 5 月，來自 208 位個案共 1779 顆冷凍卵子，其中有 89 位個案的 82 顆卵子已進行解凍，再排除掉非第三天胚胎植入的 19 位，分析 70 位個案進行第三天胚胎植入的療程結果。
取卵至進行顯微受精之操作時間軸如下圖：
Table 1. 為 89 位個案的特性及療程結果
| 解凍卵子個案 | |
|---|---|
| 解凍個案數 | 89 |
| 年齡 | 35.3±5.0 |
| 解凍卵子數 | 826 |
| 解凍存活率(%) | 87.5 (723/826) |
| 受精率(%) | 83.0±19.0 |
| 第3天好胚胎率(%) | 48.6±32.8 |
| 第3天胚胎植入個案數 | 70 |
| 植入胚胎顆數 | 3.0±0.9 |
| 懷孕率(%) | 45.7 (32/70) |
| 著床率(%) | 23.9 (50/209) |
上表可看出解凍卵子的存活率平均為 87.5%，懷孕率 45.7%，著床率 23.9%。
以上結果再細分為不同年齡層，如 Table 2.
| 個案年齡 | ≦30 | 31~35 | 36~39 | ≧40 |
|---|---|---|---|---|
| 解凍個案數 | 19 | 30 | 22 | 18 |
| 年齡 | 29.0±1.2 | 33.1±1.5 | 37.5±1.1 | 42.7±2.5 |
| 解凍卵子數 | 263 | 244 | 207 | 121 |
| 解凍存活率 (%) | 91.3a,b (240/263) |
87.7 (214/244) |
85.5a (177/207) |
83.5b (101/121) |
| 受精率 (%) | 80.4±14.5 | 81.8±21.8 | 84.4±21.1 | 87.0±15.9 |
| 第3天好胚胎率 (%) | 52.3±30.4 | 46.8±35.2 | 46.2±37.0 | 48.1±28.5 |
| 第3天胚胎植入個案數 | 15 | 24 | 17 | 14 |
| 植入胚胎顆數 | 3.3±0.7 | 2.9±1.0 | 3.0±1.1 | 3.0±0.8 |
| 懷孕率 (%) | 46.7 (7/15) |
66.7 (16/24) |
47.1 (8/17) |
7.1 (1/14) |
| 著床率 (%) | 20.0c,d (10/50) |
42.0c,e (29/69) |
25.0 (12/48) |
2.4d,e (1/42) |
a. p=0.048; b. p=0.024; c. p=0.012; d. p=0.010; e. p<0.001
上表可看出較年輕的卵子 (≤30歲) 之解凍存活率較佳 (91.3%)；31~35 歲之著床率較高(42.0%)，而 ≥40 歲使用解凍卵子的著床率較低 (2.4%)。各年齡層之受精率、D3 好胚胎率則無顯著差異。
接著於同一年齡層中分析不同的注射破卵針 (hCG) 至取卵之時間間隔對於療程結果是否有不同。
Table 3. 為 ≤35 歲個案之結果：
|
注射破卵針 (hCG) 至取卵之時間間隔 |
<34小時 | <34~35小時 | ≥35小時 |
|---|---|---|---|
| 解凍個案數 | 6 | 20 | 23 |
| 年齡 (mean±SD) | 32.5±1.8 | 31.6±2.5 | 30.9±2.3 |
| 解凍卵子數 | 66 | 213 | 219 |
| 解凍存活率 (%) | 78.8a,b (52/66) |
92.0a (196/213) |
90.0b (197/219) |
| 受精率 (%) | 78.5±26.0 | 85.2±16.7 | 78.5±19.5 |
| 第3天好胚胎率 (%) | 32.0±25.8 | 41.9±31.9 | 59.5±33.8 |
| 第3天胚胎植入個案數 | 5 | 16 | 18 |
| 植入胚胎顆數 | 3.2±1.3 | 3.3±0.8 | 2.8±0.9 |
| 懷孕率 (%) | 60.0 (3/5) |
43.8 (7/16) |
72.2 (13/18) |
| 著床率(%) | 43.8 (7/16) |
19.2c (10/52) |
43.1c (25/51) |
a. p=0.003; b. p=0.016; c. p=0.009
在 ≤35 歲這個年齡層中，若注射破卵針至取卵之時間間隔 34 小時，其解凍存活率都可達到 90% 以上。
Table 4. 為 >35 歲個案之結果：
|
注射破卵針 (hCG) 至取卵之時間間隔 |
<34小時 | 34小時～35小時 | ≥35小時 |
|---|---|---|---|
| 解凍個案數 | 5 | 14 | 21 |
| 年齡 (mean±SD) | 38.2±1.7 | 40.1±2.4 | 40.1±3.7 |
| 解凍卵子數 | 39 | 127 | 162 |
| 解凍存活率 (%) | 74.4a (29/39) |
81.1b (103/127) |
90.1a,b (146/162) |
| 受精率 (%) | 85.7±20.2 | 83.3±16.9 | 86.3±20.6 |
| 第3天好胚胎率 (%) | 55.8±37.6 | 52.6±29.7 | 43.5±34.3 |
| 第3天胚胎植入個案數 | 5 | 11 | 15 |
| 植入胚胎顆數 | 3.0±1.2 | 3.2±0.8 | 2.9±0.9 |
| 懷孕率 (%) | 40.0 (2/5) |
27.3 (3/11) |
26.7 (4/15) |
| 著床率 (%) | 13.3 (2/15) |
8.6 (3/35) |
15.0 (6/40) |
a. p=0.009; b. p=0.028
在 >35 歲這個年齡層中也得到同樣的結果:若注射破卵針至取卵之時間間隔
而在相同的破卵針至取卵之時間間隔中，不同年齡的解凍存活率差異，如 Table 5.
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注射破卵針 (hCG) 至取卵之時間間隔 |
<34小時 | 34~35 小時 | ≥35小時 | |||
|---|---|---|---|---|---|---|
| ≤35歲 | >35歲 | ≤35歲 | >35歲 | ≤35歲 | >35歲 | |
| 總解凍卵子數 | 66 | 39 | 213 | 127 | 219 | 162 |
| 存活率(%) | 78.8 (52/66) |
74.4 (29/39) |
92.0a (196/213) |
81.1a (103/127) |
90.0 (197/219) |
90.1 (146/167) |
a. p=0.003
在破卵針至取卵之時間間隔 34~35 小時這組，可看出年齡較輕 (≤35歲) 解凍存活率會比較好。
在過去的實驗中曾經發現不同成熟度的哺乳類卵子會有不同的水份、冷凍保護劑通透程度 (Le Gal F1, Gasqui P, Renard JP. 1994)，也許可以解釋此研究之結果。
在此研究中我們可以得知，卵子的年齡及注射破卵針 (hCG) 至取卵之時間間隔會影響卵子之解凍存活率。
參考資料：
-
2016 TSRM, Effects of the time interval between human chorionic gonadotropin (hCG) priming and oocyte retrieval on the survival rates of vitrified/thawed oocytes. Chun-Chia Huang, Hsiu-Hui Chen, Chung-I Chen, Pei-Wen Lin, Tsung-Hsien Lee, Chien-Hong Chen, Li-Sheng Huang, Maw-Sheng Lee.
-
Differential osmotic behavior of mammalian oocytes before and after maturation: a quantitative analysis using goat oocytes as a model.Le Gal F1, Gasqui P, Renard JP.Cryobiology. 1994 Apr;31(2):154-70.
